多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)(multiplex fluorescent immunohistochemistry,MF-IHC)是一種應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)的檢測(cè)方法。它采用TSA技術(shù),又稱之為絡(luò)胺信號(hào)放大技術(shù),通過多重?zé)晒馑毓矁r(jià)偶聯(lián)的方法來檢測(cè)樣本中的多種蛋白質(zhì)。這種方法利用HRP催化后續(xù)添加的熒光素,使熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定的結(jié)合。最后通過微波處理,前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉,共價(jià)結(jié)合的熒光素還殘留在樣品上,再進(jìn)行第二輪的孵育。等到所有的抗體孵育結(jié)束以后,熒光素都結(jié)合好以后,最后對(duì)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)。由于每一體系中都只有單一抗體孵育,因此無需要擔(dān)心抗體的交叉反應(yīng)以及一抗二抗種屬匹配的問題,大大減少了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)不同種屬抗體選擇匹配的限制。
作用:
多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)在醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。它主要用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)生物分子標(biāo)記物,例如蛋白質(zhì)、核酸、糖類等,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞和組織的深入分析。例如,在腫瘤領(lǐng)域中可以同時(shí)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的多個(gè)生物標(biāo)志物,如PD-L1、TMB、基因表達(dá)譜等,以全面、客觀地分析患者的腫瘤微環(huán)境,幫助臨床預(yù)測(cè)腫瘤對(duì)治療的反應(yīng),為患者節(jié)省治療時(shí)間和治療成本。此外,免疫組化檢測(cè)還能全景展示和統(tǒng)計(jì)腫瘤不同區(qū)域免疫微環(huán)境內(nèi)各個(gè)組分的信息,有利于更加客觀的定性、定量評(píng)估各種細(xì)胞。
總的來說,多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)是一種強(qiáng)有力的工具,可以幫助我們更好地理解疾病的機(jī)制,發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn),提高疾病的診斷率和治療成功率。
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