革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。未經(jīng)染色之細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復(fù)染法。

革蘭氏染色液原理：

通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。染色的差異主要是由于陰性與陽性細(xì)菌細(xì)胞壁的差異所引起的。

革蘭氏染色液材料：

1.葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。

2.結(jié)晶紫染色液

3.革蘭氏碘液

4.95%酒精。

5.番紅染液

6.載玻片方法、涂片標(biāo)本的制備（見實(shí)驗(yàn)一）

革蘭氏染色法1.初染：在上述已固定的涂片上，滴加結(jié)晶紫染液，染色1分鐘，水洗。

2.媒染：滴加革蘭氏碘液，作用1-3分鐘，水洗3.脫色：滴加95%酒精，并頻頻搖動玻片，至無紫色脫出為止（約20秒），水洗復(fù)染：加番紅染液，復(fù)染半分鐘，水洗，用吸水紙印干后，油鏡檢查結(jié)果：視野中可以察見兩種細(xì)菌葡萄球菌：紫色、球形、葡萄狀排列。

大腸桿菌：紅色、桿狀、散在排列。

毓秀生物科技（上海）有限公司是一家專注于生物科技前沿技術(shù)研發(fā)和科研技術(shù)服務(wù)的公司，公司建有專業(yè)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室，為眾多生物醫(yī)藥企業(yè)、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院及高校提供分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理形態(tài)學(xué)等方面科研服務(wù)。公司核心團(tuán)隊(duì)曾在國內(nèi)外許多優(yōu)秀學(xué)府從事過多年研發(fā)工作，秉承“為客戶創(chuàng)造價值，為員工實(shí)現(xiàn)夢想，為社會創(chuàng)造財(cái)富"的經(jīng)營理念，堅(jiān)持以技術(shù)創(chuàng)新為先導(dǎo)，以服務(wù)質(zhì)量為根本，為中國生物醫(yī)藥和科學(xué)研究提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。